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關於紫外可見分光光度計的幾種分析方法

點擊次數:81 發布時間:2021-03-01

    紫外可見分光光度計是一種應用很廣的分析儀器。它的應用領域涉及製藥、醫療衛生、化學化工、環保、地質、機械、冶金、石油、食品、生物、材料、計量科學、農業、林業、漁業等領域中的科研、教學等各個方麵,用來進行定性分析、純度檢查、結構分析、絡合物組成及穩定常數的測定、反應動力學研究等。因為儀器涉及到光學、電學和結構等,所以它需要在一定的環境中應用

  (1)定量分析

  根據琅伯-比爾定律,樣品的濃度和吸光度是成正比關係的,濃度越大,吸收值越高,所以分光光度計用的還是定量分析,定量分析的種類有很多,這裏介紹常用的幾種定量分析方法:

  A、法:法是紫外可見分光光度計諸多分析方法中使用較多的一種方法。這是一種以琅伯-比爾定律A=εbC為基礎的分析方法,某一物質在一定波長下ε值是一個常數,石英比色皿的光程是已知的,也是一個常數。因此,可用紫外可見分光光度計在λmax波長處,測定樣品溶液的吸光度值A。然後,根據琅伯比爾定律求出C=A/εb,則可求出該樣品溶液的含量或濃度。

  B、標準法:在選定的波長處,在相同的測試條件下,分別測試標準樣品溶液C標和被測試樣品溶液C樣的吸光度A標和A樣。然後,按下式求得樣品溶液的濃度或含量。

  C樣=A樣/A標×C標

  C、標準曲線法

  紫外可見分光光度計常用的定量分析方法是標準曲線法。即先用標準物質配製一定濃度的溶液,再將該溶液配製成一係列的標準溶液。在一定波長下,測試每個標準溶液的吸光度,以吸光度值為縱坐標,標準溶液對應得濃度為橫坐標,繪製標準曲線。將樣品溶液按標準曲線繪製程序測得吸光度值,在標準曲線上查出樣品溶液對應的濃度或含量。

  A、 其它分析方法

  除上述幾個分析方法外經常使用的分析方法外,還有比吸收係數法、二乘法、解聯立方程法和示差分光光度法。

  (2)定性分析

  如果未知物的紫外吸收光譜的吸收峰波長λmax、吸收峰波長λmin、摩爾吸光係數εmax,以及吸收峰的數目、位置、拐點與標準光譜數據完全一致,就可以認為是同一種化合物。定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什麽物質。

  定量分析和定性分析是分光光度計的兩大主要功能,特別是定量分析。其它的分析都應該是從這兩大種功能中發展出來的

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